体外受精和胚胎移植的研究进展

  【体外受精和胚胎移植的研究进展】
  
  目前,体外受精及胚胎移植技术(IVF-ET)的周期妊娠率为10%~30%,大多在15%~20%左右。如何提高IVF-ET的妊娠率,是许多学者们近年来致力探讨的问题,近十余年来已发展并衍生出一系列新技术。
  
  1.改良IVF的体外培养条件
  
  从受精至桑椹胚发育这段时间,生理状态下是在输卵管内进行的,故用模拟输卵管成分的HTF作培养液,可明显提高受精率,卵裂率。近几年有学者用人输卵管壶腹部上皮细胞与精、卵一起培养,称为联合培养或共培养,使其更接近于生理状态。

  
  2.简化体外培养程序
  
  (1)合子输卵管移植(ZIFT):卵子受精后成为合子即移回母体输卵管内。
  
  (2)原核期孕卵输卵管内移植(PROST):卵子受精后于原核期移植到母体输卵管内。
  
  (3)输卵管胚胎期移植(TEST):输卵管内环境是胚胎发育的良好环境。自然周期中,受精着床要在第6天即受精后的120h前后。现行的体外受精及胚胎移植技术(IVF-ET)过程,多在受精40—48h后,即将2~4个细胞的胚胎移植到子宫腔内,此时移植胚胎在子宫内的命运难定,因为不符合生理情况。IVF-ET 的成功率较低可能与此有关。解决此问题的方法有两个,一是输卵管胚胎期移植,可经腹腔镜或经阴道操作,后者更简便。另一方法是将胚胎冷冻保存,在下一周期可选择良机以获得成功。对此问题尚需进一步深入研究。
  
  3.胚胎的冷冻保存
  
  在程序式降温仪控制下将正常胚胎冻存于196℃液氮中,待需要时复苏使用。用途:①治疗周期多余的胚胎冷冻保存;②治疗周期发生卵巢过度刺激综合征(OHSS)可能性大,胚胎冻存于自然周期移植;③供胚。
  
  4.卵子或胚胎赠送
  
  用于:①卵巢早衰或卵巢切除;②有遗传疾病或异常基因携带者。
  
  5.显微授精
  
  对于常规IVF不能受精的患者,需采用辅助授精的方法,显微授精技术应运而生。
  
  (1)显微授精的方法:①透明带钻孔术及部分透明带切除(PZD):前者是用化学(如酶、酸性Tyrodes)方法及机械方法使透明带形成一裂隙,后者是用机械压力使透明带部分裂开。②透明带下授精法(SUZl):将单个或多个精子注入透明带下卵黄膜外间隙。③卵母细胞单精子显微注射(ICSI):将单个精子直接注入卵母细胞浆内。
  
  (2)适应症:①严重男性不育;②严重少精症:精子计数<5×106/ml;③精子不活动或穿透卵子能力低弱;④输精管阻塞或缺如;⑤多次常规IVF-ET周期失败(不受精)。
  
  (3)禁忌症:主要为染色体异常、严重先天畸形,故在所有患者进行ICSI法受精前,需检查夫妇双方染色体核型及激素水平。
  
  6.辅助孵出技术(AH)
  
  透明带(ZP)是早期胚胎卵裂球外周的非细胞结构性的粘蛋白,起着保护早期胚胎的作用。在IVF-ET的体外胚胎培养环境使ZP变硬,胚胎移植至宫腔内会出现孵出困难或障碍,这可能是种植失败的因素之一。AH是用化学方法使ZP变薄,或用化学物质、激光、机械方法在ZP上打孔,以利囊胚冲出ZP而促进着床的一种显微操作技术。目前进行AH的方法有四种;①机械性部分ZP切开术;②化学物质钻孔法;③激光钻孔法;④化学物质使透明带整周变薄法。由于AH是近年来才在发展起来的一项新技术,其效果尚待进一步证实。
  
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